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烁朴实验干货 2

发布时间

2024-06-12

1、HE染色如何区分血管的内膜、中膜和外模?

回答:这个可以对血管采用横切的方法,会观察到血管的三层结构,内膜由单层扁平内皮细胞构成,较薄;中膜由平滑肌纤维和弹性纤维组成,较厚;外膜为输送结缔组织组成。

2、爬山细胞怎么做免疫组化,HE染色技术详细步骤,详细大佬

回答:您是指细胞爬片么。。。如果是细胞爬片,我给出以下步骤:

  1. 切片厚度4微米左右;
  2. 烤片3790min,脱蜡1h
  3. PBS洗三次,每次5min
  4. 3%过氧化氢 15min 避光;
  5. PBS洗三次,每次5min
  6. EDTA抗原微波修复,高火至沸腾转低火,再冷却至室温;
  7. 血清封闭,时间根据不同抗体不同组织变化;
  8. 甩干后滴加一抗,过夜或37度孵育;
  9. PBS洗三次,每次5min
  10. 滴加二抗,通常1h
  11. PBS洗三次,每次5min
  12. DAB显色,随时镜检终止反应;
  13. 流水冲洗;
  14. 苏木素染色3min后反蓝;
  15. 梯度脱水后封片镜检。

 

3、请问一下,HE染色完毕到封片的时间间隔,最长是多久呢?

回答:这个是在切片完全干后尽快封片为最好,之前我使用过性腺组织做过实验,实验种最长放置一夜,第二天早上封片,结果没有问题。