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烁朴实验室疑难解答1
发布时间
2024-06-12
1、小鼠脑部组织切片用什么方式比较好？
网友：我想对脑部的核蛋白进行免疫组化，想问一下，石蜡切片比较好，还是冰冻切片，一般固定采用什么方式，方便给一下具体操作步骤吗？谢谢
回答：常规病理样品采用10%中性福尔马林进行固定，免疫染色样品可以用4%的多聚甲醛固定，以上两种固定液体积应超过组织体积10倍，看固定液状态进行更换；如果考虑做超微病理例如电镜，可以用2.5%戊二醛进行固定，电镜样品的固定要即时取材即时固定，同时取材要薄，小；如果是免疫组化的话，冰切和石蜡都没有太大区别，免疫荧光的话推荐冰切。
2、肝脏染色
各位同学，我做的HE染色在显微镜下看组织都干的一列一列的，这是脱水过渡还是包埋没包好啊？有没有好的建议和方法？
回答：最好提供一下具体的染色图，听您的描述是组织在染色图片中呈现出皲裂的状态（这个干是指您看到了细胞固缩还是什么其余情况，我这边就简单描述下裂片可能产生的原因）
- 脱水过度，导致组织变硬，切片时会导致图片成裂片状态或脱片；
- 烤片阶段，烘烤的温度或者时间过高或过长，会导致组织裂片或脱落；
- 展片步骤，展片时间过长也会导致组织裂片；
- 固定不完全，部分内部组织为固定透也会产生这样的结果。
具体的情况还需要看整张片子的具体情况，如果时没有固定透，切片图中会出现迷糊和灰染的现象。
3、HE染色，如何观察肿瘤血管生成？
将小鼠皮下成瘤的肿瘤组织进行石蜡切片并进行HE染色，请教各位如何通过HE染色判断血管生成情况？血管成什么样的形态？
回答：这个血管形成在HE中只能观察一个大概，想要进一步确认和观察建议使用免疫染色，可以使用血管内皮生长因子（VEGF）、血管生成素抗体等。
4、HE染色封片后能重染吗？
HE染色封片后发现颜色太浅，能够把片子重新染色封片吗？
回答：可以的，需要将片子放入分化液中分化，洗去染色后重新染色即可，不过染色时间会适当缩短，镜检后再进行封片。
5、做HE染色石蜡切片切的组织块位置对结果有影响吗？
回答：我理解为取材的组织位置，这个会对结果产生影响，以肾脏为例，包含的结构有肾皮质、肾乳头、肾盂，肾动脉、肾静脉等，不同的取材位置甚至不同的切法（横纵切），都会看到不同的组织或者相同组织的不同面。
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